اخذ العينات داخل الغرف العقيمة

في إجراءات التحقق من صحة طريقة أخذ العينات للهواء (Active Air Sampling) داخل الغرف العقيمة، يُشترط تعريض الأطباق (Settle Plates) للهواء لمدة 4 ساعات، وذلك وفقًا لمتطلبات دليل الاتحاد الأوروبي للممارسات التصنيعية الجيدة (EU GMP) وكذلك الملحق USP <1116> الذي يحدد الحد الأقصى بـ4-5 ساعات للأطباق القياسية.
وقد أظهرت دراسات التحقق أن التعرض لمدة 4 ساعات يؤدي إلى انخفاض في معدل استرجاع الكائنات الحية الدقيقة مقارنة بالفترات الأقصر، وذلك بسبب تبخر الماء من الوسط (Agar Media) نتيجة تغيرات تدفق الهواء والرطوبة والحرارة داخل الغرفة النظيفة، مما يبدأ بعد 30 دقيقة تقريبًا ويؤدي إلى انكماش الأطباق وفقدان وزنها بعد 4 ساعات، وبالتالي تقل قدرة الوسط على دعم نمو الميكروبات.
كما أن حجم الجسيمات يلعب دورًا هامًا؛ إذ تترسب الجسيمات الكبيرة بسرعة بفعل الجاذبية، بينما تترسب الجسيمات الأصغر ببطء أكبر تحت تأثير تدفق الهواء وضغط الغرفة.
تم تحديد هذه المدة الزمنية (4 ساعات) حسابيًا بناءً على معدلات ترسب الكائنات الحية وسرعة الهواء وحجم الجسيمات الحاملة للميكروبات (Microbe-Carrying Particles – MCPs)، مع الأخذ في الاعتبار استرجاع وحدات تكوين المستعمرات (Colony Forming Units – CFU) وحجم المنطقة المكشوفة ووقت التعرض، لضمان تمثيل دقيق للتلوث الميكروبي في البيئة المراقبة.