عمليات غسيل عمود الكروماتوغرافيا

تتضمن عمليات تحليل الكروماتوغرافيا عالي الأداء (HPLC) عدة خطوات واعتبارات أساسية لضمان نتائج دقيقة. تبدأ العملية بـ “غسيل العمود” (Washing) لإزالة الشوائب، ويُنصح باستخدام تسلسل محدد يتضمن الماء المقطر، الماء مع أملاح (Buffer salts)، ثم المذيب العضوي (Organic solvent) بناءً على التركيب الكيميائي للمركب (Compound).

المرحلة الثابتة (Stationary phase) في العمود تعتمد على تفاعلات معينة، مثل التفاعل الهيدروفوبي (Hydrophobic interaction) مع الكربون (Carbon) في العمود، أو روابط الهيدروجين (Hydrogen bond) مع ذرات السيلانول (Silanols). بالنسبة للمركبات الأساسية (Basic compounds)، قد تكون هناك آثار (Traces) تحتاج إلى استخدام أملاح التخزين في المرحلة السائلة (Mobile phase) مع ملح التخزين (Buffer salt) لتحسين الفصل.

بالنسبة لتسلسل الغسيل، يُفضل البدء بالماء ثم إضافة الأملاح ، تليها المذيبات العضوية. يعتمد اختيار المذيب على هيدروفوبية (Hydrophobicity) وقطبية (Polarity) المركب. التفاعل الهيدروفوبي بين المركب والكربون في المرحلة الثابتة يلعب دوراً رئيسياً، بينما روابط الهيدروجين قد تؤثر على المركبات الحمضية (Acidic) أو الأساسية (Basic).

لتحسين الأداء، يمكن استخدام حامض الفوسفوريك (Phosphoric acid) بنسبة 0.1% في المحلول مع المركبات الأساسية لتقليل تأثير أيونات الهيدروجين (Hydrogen ions) مع السيلانولات. في النهاية، تأكد من غسل العمود بمحلول مناسب للحفاظ على استقراره.
هذه الخطوات البسيطة تضمن عملية فعّالة وموثوقة لتحليل العينات باستخدام HPLC.