فصل الشوائب باستخدام تقنيات HPLC

الشوائب (Enantiomeric Impurities) هي الإنانتيومير المعاكس غير المرغوب فيه الذي يتواجد داخل المادة الفعالة للدواء. على سبيل المثال، إذا كان الدواء المطلوب هو الإنانتيومير (R) فقط لأنه الشكل النشط دوائيًا، فإن وجود أي نسبة من الإنانتيومير (S) معه يُعتبر شائبة إنانتيوميرية.

هذه الشوائب قد تشكل مشكلة كبيرة لأن الإنانتيومير المعاكس قد يكون أقل فعالية أو معدوم الفعالية، أو في بعض الحالات يكون سامًا، أو يسبب آثارًا جانبية مختلفة تمامًا عن الشكل الرئيسي، ولذلك يجب التحكم في نسبتها بدقة عالية جدًا في صناعة الأدوية.يُعتبر الـ HPLC الطريقة الأكثر شيوعًا واعتمادًا في الصناعة لفصل وتقدير هذه الشوائب، ويعتمد بشكل أساسي على استخدام أعمدة متخصصة مثل Chiralpak أو Chiralcel أو Lux، والتي تحتوي على مواد ثابتة قادرة على التمييز بين الإنانتيومير (R) و(S) وفصلهما بشكل واضح.

في بعض الحالات النادرة التي لا يوجد فيها عمود مناسب، يتم اللجوء إلى طريقة الاشتقاق (Chiral Derivatization) حيث يُحوَّل الإنانتيوميران إلى مشتقات كيميائية مختلفة يمكن فصلها بعد ذلك باستخدام HPLC عادي.

من المهم جدًا عند تطوير وتطبيق هذه الطرق التأكد من وجود فصل كامل وواضح (resolution جيد) بين القمتين، وقياس كمية الشائبة بدقة عالية، والتحقق من صحة ودقة الطريقة ككل، مع حساب النسبة المئوية للإنانتيومير الشائب بدقة (مثال: إذا كانت مساحة القمة الرئيسية 1000 ومساحة قمة الشائبة 5، فإن النسبة تصبح 0.5%).

حدود القبول لهذه النسبة لا تُحدد بشكل عشوائي، بل تعتمد على المونوغراف الخاص بالدواء إن وجد، وإرشادات ICH Q3A وQ3B، وبيانات السمية الخاصة بالإنانتيومير المعاكس، والمعلومات السريرية المتوفرة، بالإضافة إلى توصيات USP <1782> الذي يُركز على تقييم وتطوير طرق الفصل كإرشاد وليس كاختبار مباشر.

يجب أيضًا الانتباه إلى إمكانية حدوث تحول (racemization) بين الإنانتيوميرين (R ⇌ S) أثناء التخزين أو التحليل أو التعرض للحرارة أو التغيرات في الـ pH، لأن ذلك قد يؤدي إلى زيادة غير متوقعة في نسبة الشائبة. في النهاية، فصل الإنانتيوميرات ومراقبة نسبة الشوائب الإنانتيوميرية بدقة يُعد أحد أهم المتطلبات في ضمان جودة وسلامة وفعالية الأدوية.